细菌域，变形菌门，γ-变形菌纲，肠杆菌目，肠杆菌科，埃希氏菌属，大肠杆菌种
2、大肠杆菌形状特征：革兰氏阴性短杆菌，巨细0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运动，无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气，兼性厌氧菌。该菌在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中存活更久。胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用。对磺胺类、链霉素、氯霉素等灵敏，但易耐药，是由带有R因子的质粒搬运而取得的。
①土铲、盛9m1无菌水的试管、三角烧瓶、盛100m1无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶、无菌玻璃涂棒、无菌吸管、接种环、酒精灯、火柴、无菌培育皿、显微镜、载玻片、盖玻片、量筒、吸水纸、烧杯、电炉、石棉网、镊子、恒温培育箱、生化培育箱高温灭菌锅、电子天平、天平、pH试纸、擦镜纸、棉花、纱布、报纸、试管架、试管夹、标签、记号笔、放大镜、载物盘等。②蒸馏水、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、K2HPO4、NaCl、乳糖、2%伊红Y溶液、0.35%美蓝溶液、柠檬酸铁铵、Na2S2O3·5H2O（硫代硫酸钠）、3%～10%过氧化氢、香柏油、草酸铵结晶紫染液、革兰氏碘液、95%乙醇、番红染液
5、调查外部特征、镜检，将疑似大肠杆菌菌种接种到牛肉膏蛋白胨斜面上，进行扩展培育。
配方：牛肉膏（1克）；蛋白胨（2克）；氯化钠（1克）；琼脂（4克）；水（200毫升）
办法：在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，参加琼脂，不断拌和避免粘底。等琼脂*溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，制斜面。
配方：乳糖（2克），蛋白胨（2克），NaCl（1克），K2HPO4（1克），2%伊红水溶液（4毫升），0.35%美蓝水溶液（4毫升），琼脂（4克），水（200毫升），pH7.1注：先调PH，灭菌在加乳糖、伊红、美蓝
办法：先配200毫升蛋白胨水琼脂培育基加热溶化，冷却至60℃左右时，再把已灭菌的乳糖溶液、伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作参加。摇匀后，当即倒平板（见第三步）。乳糖在高温灭菌易被损坏有必要严控灭菌温度，一般是0．70kg/cm2（10磅/英寸2），115．2℃灭菌20分钟。
配方：蛋白胨（2克），NaCl（1克），柠檬酸铁铵（0.1克），硫代硫酸钠（0.1克），琼脂（1.2克），蒸馏水（200毫升），PH7.6
3、倒平板：需求倒三皿，避免失利可多做几皿。其办法是右手持盛伊红美蓝培育基的试管或三角烧瓶，置火焰周围，左手拿平皿并松动试管塞或瓶塞，用手掌边际和小指、无名指夹住拔出，假如试管内或三角烧瓶内的培育基一次可用完，则管塞或瓶塞不用夹在手指中。试管（瓶）口在火焰上灭菌，然后左手将培育皿盖在火焰邻近翻开一缝，敏捷倒入培育基约15ml，加盖后悄悄摇摆培育皿，使培育基均匀分布，平置于桌面上，待凝后即成平板。也可将平皿放在火焰邻近的桌面上，用左手的食指和中指夹住管塞并翻开培育皿，再注入培育基，摇匀后制成平板。别离标号10-4、10-5、10-6。
4、土壤稀释液的制备：在沈阳大学4号楼门前树林内选取土样，称取土壤1g，放入99mL无菌水的三角瓶中，振动10min，即为稀释10－2的土壤悬液。另取装有9mL无菌水试管4支，用记号笔编上10－3、10－4、10－5、10－6。取已稀释成10－2的土壤液，振动后停止0.5min，用无菌吸管汲取1mL土壤悬液参加10－3的无菌水的试管中，并在试管内悄悄吹吸数次，使之充沛混匀，即成10－3土壤稀释液。同法顺次接连稀释至10－4，10－5，10－6土壤稀释液。在土壤稀释过程中，运用一支吸管由浓到稀，稀释究竟。
5、涂布接种：稀释结束后，可用本来的移液管，从菌液浓度zui小的10-6的稀释液开端汲取1ml10-6稀释液，加到相应编号10-6的无菌培育皿内，以相同办法别离汲取1ml10-5、10-4的稀释液加到相应编号为10-5、10-4的无菌培育皿内。用无菌玻璃涂棒在培育基外表悄悄地涂布均匀。37℃恒温箱培育48小时。
6、调查初检：三种菌种浓度的培育皿中均会呈现大肠杆菌菌落，寻觅菌落中心呈暗蓝黑色，发金属光泽的菌种。并进行镜检,调查。
7、扩展培育：将疑似菌落接种于斜面培育基上，进行扩展培育。37℃培育48小时。
①革兰氏染色：经革兰氏染色可见革兰氏阴性的短杆菌,两头钝圆。散在或成对存在；
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